PVDF膜即聚偏二氟乙烯膜(polyvinylidene fluoride)是蛋白質印跡法中常用的一種固相支持物。PVDF膜是疏水性的,膜孔徑有大有小,隨著膜孔徑的不斷減小,膜對低分子量的蛋白結合就越牢固。
PVDF膜比較貴,但是做WB的“殺手锏”。與硝酸纖維素膜相比,PVDF膜在蛋白質截留能力,機械強度和化學相容性上都更優越的性能(Pluskal,et al.,1986)。市售硝酸纖維素膜的典型結合量是80-100μg/cm2,而PVDF膜結合量是100-200μg/cm2(而結合強度PVDF比硝纖膜強6倍?。?。但是PVDF膜最大的優點不僅于此:更好的機械強度和化學耐受性使PVDF膜在各種染色應用和多重免疫檢測中成為理想選擇;而且單個凝膠的泳道復本可用于多種目的,如考馬斯亮藍染色后切出條帶并進行N-末端測序、蛋白消化/肽分離/內部測序和免疫檢測(Kurien,et al.,2003)。特別是需要做N端蛋白測序,在相當“嚴酷”的清洗條件下,當尼龍或者硝纖膜已經降解的情況下PVDF膜依然保持本色,笑傲江湖。所以PVDF也是要做蛋白測序的唯一選擇。PVDF膜同樣分0.45um和0.2um的,后者孔徑小,對小分子蛋白有較好的攔截吸附,背景可能會比前者稍高。